en بررسی خصوصیات بیوفیزیکی و الکتروفارماکولوژیکی تک کانال mitoKATPدر غشاء داخلی میتوکندری مغز موش صحرایی Nervous system (others) Others Experimental research article Experimental research article مقدمه: کانالهای پتاسیمی حساس به ATP مختلفی در‌غشاء داخلی میتوکندری شناسایی شده‌اند. این کانالها درفرایندهای سلولی همچون حفاظت سلولی نقش دارند. در‌اینجا ما خواص بیوفیزیکی و الکتروفارماکولوژی یک کانال KATP را در غشاء داخلی میتوکندری مغز گزارش نموده‌ایم. روش ها: مغز موش بزرگ آزمایشگاهی بالغ بعد ازبرداشتن، هموژنیزه و محلول آن درطی مراحل MSE-دیژیتونین، آب، و بیکربنات سدیم سانتریفیوژ و وزیکول‌های غشاء داخلی میتوکندری جدا گردید. فسفاتیدیل کولین از زرده تخم مرغ استخراج گردید. غشاء در منفذی به قطر µm 150 تشکیل شد. سیگنالهای ثبت تک کانال kHz 1 فیلتر و با سرعت نمونه برداری kHz 10 ذخیره گردیدند. اطلاعات با نرم افزار Pclamp 10 آنالیز گردیدند. نتایج: ثبت‌ تک‌کانال، کانالی با کنداکتانس pS7 ± 143 و وابسته به ولتاژ را درمحیط غلظتی 200 mM KCl cis/50 mM KCl trans نشان داد. توزیع‌های زمانی وضعیت بسته، یک جزء توانی را برای ولتاژهای مثبت و دوجزء توانی را برای ولتاژهای منفی نشان داد. توزیع‌های زمانی وضعیت باز بر دوجزء توانی باز بودن منطبق بود.مهار کانال توسط ATP و گلیبن‌کلامید از مشخصه‌های کانال، بعنوان کانال KATP بود. 4-AP و TEA فعالیت کانال را مهار نموده ولی فعالیت کانال تحت تاثیر ایبریوتوکسین و کاریبوتوکسین بعنوان مهارکننده‌های کانال BK تغییر پیدا نکرد و5-هیدروکسی‌دکانوئیک اسید بعنوان بازدارنده کانال پتاسیمی حساس به ATP کانال را تحت تاثیر قرار نداد. وسترن‌بلات واستفاده از آنتی‌بادی‌هایی برضد زیرواحدهای Kir6.1 و SUR2B، پروتئینهایی با وزن مولکولی ~55-64 kDa و ~120 kDa را مشخص نمود. بحث و نتیجه‌گیری: نتایج ما حضور کانال KATP را در میتوکندری مغز نشان می‌دهد. این کانال احتمالاً نقش مهمی در همئوستازی میتوکندری مغز دارد. Introduction: Different ATP-sensitive potassium channels have been detected in the mitochondrial inner membrane of cells. They are suggested to be involved in cell processes including cell protection. Here, we characterized the biophysical and electropharmacological properties of a KATP channel in the brain mitochondrial inner membranes. Methods: After removing and homogenizing the rat brain, the supernatant was separately centrifuged in MSE digitonin, H2O and Na2CO3 and mitochondrial inner membrane vesicles were obtained in MSE solution. L-α- Phosphatidylcholine (membrane lipid) was extracted from fresh egg yolk. Bilayer lipid membranes were formed in a 150 μm diameter hole. All recordings were filtered at 1 kHz and stored at a sampling rate of 10 kHz for offline analysis by PClamp10. Results: Single channel recordings revealed a channel with a slope conductance of 143 ± 7pS in voltage dependent 200 mM KCl cis/50 mM KCl trans. The closed dwell time distributions indicated one and at least two exponential components at positive and negative potentials, respectively. The open dwell time events were fitted to two exponential functions. The block by ATP and glibenclamide characterized this channel as the KATP channel. We also showed that 4- AP and TEA inhibited the channel activities. The activity of channel was not influenced by iberiotoxin, a BK channel blocker, and 5-hydroxydecanoic acid, an inhibitor of mitochondrial ATP-sensitive potassium channels. Western blotting with antibodies directed against Kir6.1 and SUR2B subunits recognized a blocking-peptide-sensitive with a molecular mass of ~55-64kDa and ~120kDa, respectively. Conclusion: This channel is likely to be involved in maintaining proper homeostasis in brain mitochondria and cell processes. mitoKATP، میتوکندری، غشاء دو لایه لیپیدی ، IbTx ، glibenclamide mitochondria, potassium channel, mitoKATP, IbTx, glibenclamide 283 299 http://ppj.phypha.ir/browse.php?a_code=A-10-461-2&slc_lang=en&sid=1 Javad Fahanik babaei fahanikbabaei1358 3200319475328460012107 3200319475328460012107 No Afsaneh Eliassi afeliassi@gmail.com 3200319475328460012108 3200319475328460012108 Yes Reza Saghiri 3200319475328460012109 3200319475328460012109 No