en نقش یک بلاکر کانال های کلسیمی وابسته به ولتاژ بر مهار آپوپتوزیس نورون های حسی گانگلیون های کشت شده ریشه پشتی نخاع رت بالغ Nervous system (others) Others Experimental research article Experimental research article مقدمه: تحت شرایط پاتولوژیک، غلظت داخل سلولی کلسیم بطور غیر طبیعی افزایش یافته و منجر به مرگ سلولی می شود. در این پژوهش بلاکر کانال های کلسیمی وابسته به ولتاژ مورد استفاده قرار گرفت تا نقش آن در آپوپتوزیس نورون های حسی گانگلیون های کشت شده ریشه پشتی نخاع رت بالغ مورد بررسی قرار گیرد. روش ها: گانگلیون های L5 از گانگلیون ریشه پشتی نخاع رت های بالغ خارج و به سه گروه تقسیم شدند: 1- گانگلیون های لحظه زمانی صفر که بلافاصله فیکس شدند، 2- گانگلیون های کنترل 3- گانگلیون های تیمار شده با لوپرامید هیدروکلراید (200 میکرومولار). گروه های کنترل و تیمار برای لحظه‌های زمانی 72 ساعت در محیط کشت انکوبه و سپس فیکس شدند. کلیه گانگلیون های فیکس شده با استفاده cryostat برش گیری شدند. برای مطالعه مورفولوژیکی و بیوشیمیایی آپوپتوزیس نورون‌های حسی، به ترتیب از رنگ‌آمیزی فلئورسنت (پروپیدیوم آیوداید و هوخست 33342) و تکنیک تانل استفاده شد. آنالیز آماری داده ها از طریق آنالیز واریانس یک طرفه (ANOVA) و آزمون Tukey صورت گرفت. یافته ها: نورون‌های حسی گانگلیون‌های کشت شده برای 72 ساعت، مشخصات مورفولوژیکی آپوپتوزیس شامل چروکیدگی سیتوپلاسم، تراکم هسته و متراکم شدن کروماتین را نمایان ساختند. علاوه بر آن، اکثر نورون های حسی به صورت تانل مثبت ظاهر شدند. در این زمان کاربرد بلاکر کانال های کلسیمی وابسته به ولتاژ (لوپرامید هیدروکلراید، 200 میکرومولار) نه تنها توانست مشخصات مورفولوژیکی و بیوشیمیایی آپوپتوزیس را در نورون های حسی گانگلیون های کشت شده مهار نماید، بلکه توانست میانگین قطر هسته این نورون ها را بطور معنی داری نسبت به گروه کنترل افزایش دهد. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه بیانگر آن بود که افزایش کلسیم داخل سلولی احتمالا یکی از دلایل آپوپتوزیس نورون های حسی در گانگلیون های کشت شده ریشه پشتی نخاع می باشد. Introduction: Under pathological conditions, abnormal increase in intracellular calcium concentrations is believed to induce cell death. In the present study, a voltage-sensitive calcium channel blocker (loperamide hydrochloride) was used to investigate its role in inhibition of apoptosis in sensory neurons of cultured spinal dorsal root ganglia (DRG). Methods: L5 DRG from adult rats were dissected and divided into three groups: 1. Freshly prepared DRG 2. Control DRG and 3. DRG treated with voltage-sensitive calcium channel blocker (loperamide hydrochloride, 200 μM). The control and the treated DRG were incubated in a culture medium for 72 hours. The DRG were then fixed and sectioned by a cryostat. Morphological and biochemical features of apoptosis in sensory neurons were studied by fluorescent staining (Propidium iodide and Hoechst) and TUNEL methods, respectively. Results: After 72 hours in culture, sensory neurons displayed morphological features of apoptosis. Most of these neurons also appeared as TUNEL positive. At this time period, the application of loperamide hydrochloride not only inhibited both morphological and biochemical features of apoptosis in the sensory neurons but also significantly increased the mean diameter of nucleus in these neurons compared to the control. Conclusion: This study showed that elevated intracellular calcium concentration might be one of reasons for apoptosis of sensory neurons in the cultured DRG. گانگلیون‌های ریشه پشتی، نورون حسی، آپوپتوزیس، لوپرامید هیدروکلراید. Dorsal root ganglia, Sensory neuron, Apoptosis, Loperamide hydrochloride 51 59 http://ppj.phypha.ir/browse.php?a_code=A-10-648-1&slc_lang=en&sid=1 Hamid Reza Momeni حمید رضا مومنی h-momeni@araku.ac.ir 3200319475328460011813 3200319475328460011813 Yes Mohammad Ali Shariatzadeh محمد علی شریعت زاده 3200319475328460011814 3200319475328460011814 No Ahmad Hamta احمد همتا 3200319475328460011815 3200319475328460011815 No Maryam Mirfakhrai مریم میر فخرایی 3200319475328460011816 3200319475328460011816 No Najmeh Eskandari نجمه اسکندری 3200319475328460011817 3200319475328460011817 No