Physiology and Pharmacology

en بررسی مکانیسم سمیت سلولی دو مشتق مهار کننده آنزیم سیکلواکسیژناز-2 در سلول های سرطان خون Evaluation of cytotoxicity mechanism of two cyclo-oxygenase-2 inhibitors in leukemia cell line Pharmacokinetics/Dynamics Pharmacokinetics/Dynamics Experimental research article Experimental research article مقدمه: سرطان خون از جمله عوامل عمده مرگ و میر بشمار می رود که به دلیل بروز مقاومت دارویی، داروهای شیمی درمانی روز توانایی پاسخ به آن را ندارند. بنابراین همیشه دارویی جدید جهت درمان نیاز است. ترکیبات مهار کننده آنزیم سیکلوکسیژناز-2 می توانند کمک کننده باشند و همراه با داروهای متداول شیمی درمانی باعث کاهش دوز مصرفی آنها گردند. در این مطالعه اثرات سمیت سلولی و تغییرات مورفولوژیک ترکیبات A (3-(4-chlorophenyl) -5-(4-flurophenyl)-4-Phenyl-4,5-dihydro-1,2,4-oxadiazole) و B (3,5-bis(4-chlorophenyl)-4-Phenyl-4,5-dihydro-1,2,4-oxadiazole) به عنوان مشتقات مهار کننده آنزیم سیکلوکسیژناز-2 در رده سلولی سرطان خون بررسی و مکانیسم بالادست آنها با مطالعه بیان فاکتورNF-κB (nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells) و FHC (Ferritin Heavy Chain) بررسی شد.<o:p /> روش ها: پس از کشت سلول های سرطان خون (K562) و محاسبه IC50 آنها، سلول ها با دو ترکیب فوق در غلظت معادل IC50، به مدت 16 ساعت مجاور و تغییرات مورفولوژیک آنها با میکروسکوپ فلورسانس بررسی شد. همچنین پس از لیز سلول ها و استخراج پروتئین آنها، بیان فاکتور NF-κB از طریق کیت سنجش NF-κB و بیان پروتئین FHC از طریق وسترن بلات سنجش گردید.<o:p /> یافته ها: در بررسی میکروسکوپیک سلولها با رنگ آمیزی DAPI، تغییرات مورفولوژیک مرتبط با آپوپتوز پس از تیمار با ترکیبات فوق در سلول ها مشاهده شد. سنجش فاکتور NF-κB بیانگر کاهش این فاکتور توسط ترکیب B بود. بیان پروتئین FHC نیز در سلول های تیمار شده با ترکیب B کاهش یافت.<o:p /> نتیجه گیری: ترکیب Bباعث ایجاد سمیت سلولی و تغییرات مورفولوژیکی سلولی، با مکانیسم احتمالی NF-κB/FHCدر سلول های سرطان خون می گردد.<o:p /> Introduction: Leukemia is considered one of the main causes of death, and current chemotherapeutic agents are unable to provide optimal responses due to chemo-resistance. Therefore, there is a constant need for new drugs. Cyclooxygenase- 2 (COX-2) inhibitors can be helpful by reducing the necessary dose of routine chemotherapeutic drugs. Herein, we evaluated the cytotoxicity activity as well as the morphological changes induced by compounds A (3-(4- chlorophenyl)-5-(4-flurophenyl)-4-Phenyl-4,5-dihydro-1,2,4-oxadiazole) and B (3,5-bis(4-chlorophenyl)-4-Phenyl-4,5- dihydro-1,2,4-oxadiazole) as COX-2 inhibitors. In addition, the upstream mechanism was investigated by measuring expression of nuclear factor kappa light-chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) and ferritin heavy chain (FHC). Methods: K562 leukemia cell line was cultured, treated with the above-mentioned two compounds, and their IC50 values obtained. Compounds A and B-treated cells were analyzed for morphologic changes by fluorescence microscope after 16 h incubation at their IC50 concentrations. The protein fraction of whole cell lysate was prepared to evaluate NF- κB by NF-κB assay kit. FHC expression was also determined using western blotting. Results: Treatment of cells with the compounds A and B resulted in considerable apoptotic morphological changes according to DAPI staining. NF-κB assay demonstrated its significant decrease due to compound B. Our experiment also revealed a significant reduction in FHC expression after treatment with compound B. Conclusion: Compound B can induce cytotoxicity and morphological changes in leukemic cell line probably through NF-κB/FHC pathway. واژه های کلیدی: سیکلواکسیژناز-2, سرطان خون, آپوپتوز, FHC, NFκB COX-2, Leukemia, FHC, NF-κB 16 26 http://ppj.phypha.ir/browse.php?a_code=A-10-722-1&slc_lang=en&sid=1 Shaghayegh Norouzi شقایق نوروزی shagayeg_norozi@yahoo.com 3200319475328460013913 3200319475328460013913 No Mahnaz Norouzi مهناز نوروزی noroozi.mahnaz@gmail.com 3200319475328460013914 3200319475328460013914 No Saeed Ayerian سعید آیریان aryanairian2003@yahoo.com 3200319475328460013915 3200319475328460013915 No Mohammad Nabiuni محمد نبیونی nabiuni@tmu.ac.ir 3200319475328460013916 3200319475328460013916 No Mohsen Amini محسن امینی 3200319475328460013917 3200319475328460013917 No Mona Salimi مونا سلیمی salimimona@pasteur.ac.ir 3200319475328460013918 3200319475328460013918 Yes