OTHERS_CITABLE Acute Administration of Estradiol Protects against Spinal Ischemic-Reperfusion Injury in Male Rabbits Introduction: Postoperative neurological deficit is the most devastating complication after thoracoabdominal aortic aneurysm repair. Despite demonstrated neuroprotective effects of estradiol, its protective efficacy against spinal cord ischemia-reperfusion and underlying mechanisms are not yet elucidated. Methods: Two groups, each of 10 New Zealand white male rabbits, were studied. Control group received sesame oil (vehicle) while the treatment group received 17-β-Estradiol Cypionate (1 mg/kg) dissolved in sesame oil, 30 minutes before abdominal aortic clamping for 18 minutes. A group of sham operated animals was also included, which consisted of 5 rabbits subjected to operative dissections without aortic occlusion. After 48 h reperfusion we investigated the efficacy of estradiol in attenuating the spinal cord ischemia-induced pathology through neurological, histopathological, and western blot assessments. Results: The results showed that administration of estradiol 30 minutes before induction of spinal cord ischemia in rabbits improved functional outcome and prevented the worsening pattern of neurological function over 48 hours. Near to normal histopathological outcome of lumbar part of spinal cords in these animals confirmed neuroprotective effects of estradiol. Estradiol also reduced spinal cord Heat shock protein 70 and cleaved caspase-3 in this ischemic context. Conclusion: Estradiol can be considered as a potential candidate to protect against spinal cord ischemiareperfusion- induced paraplegia resulting from thoracoabdominal aortic aneurysm repairs. http://ppj.phypha.ir/article-1-605-en.pdf 2014-05-15 1 11 Key words: Estradiol Spinal cord ischemia-reperfusion Heat shock protein 70 Cleaved caspase 3 Leila Khalaj 1 AUTHOR Habibollah Peirovi 2 AUTHOR Fariba Khaodagholi 3 AUTHOR Azadeh Abdi 4 AUTHOR Leila Dargahi 5 AUTHOR fatemeh mohagheghi 6 AUTHOR abolhassan Ahmadiani 7 AUTHOR
OTHERS_CITABLE نقش تنظیمی نیتریک اکساید بر خواص الکتروفیزیولوژیک پایه و وابسته به سرعت گره دهلیزی-بطنی قلب جدا شده خرگوش: نقش گیرنده های سمپاتیک و پاراسمپاتیک مقدمه: مطالعات اخیر نشان داد که سیستم نیتررژیک اثرات تنظیم کننده بر روی خواص الکتروفیزیولوژیک گره دهلیزی-بطنی دارد. هدف این مطالعه، تعیین اثرات متغیر نیتریک اکساید(NO) بر روی خواص الکتروفیزیولوژیک گره دهلیزی-بطنی جدا شده خرگوش وتحقیق بر روی نقش گیرنده های آدرنرژیک و کولینرژیک در مکانیسم اثرات می باشد. روش ها: در آزمایشگاه ما ، مدل آزمایشگاهی گره دهلیزی – بطنی جدا شده خرگوش ( 1.5-2 کیلو گرم)استفاده شد.پروتکل های تحریکی اختصاصی ریکاوری،تسهیل ،خستگی و ونکباخ در حالت کنترل و دارو استفاده شدند. تعداد 35 خرگوش به طور مساوی و تصادفی به5 گروه(n=7)1) ال-آرژنین (L-Arg)،2)مهارکننده آنزیم نیتریک اکساید سنتاز(L-NAME)،3) ال-آرژنین+ال-نیم4) نادولول+ ال-آرژنین (آنتاگونیست گیرنده های بتا) و5) آتروپین+ ال-آرژنین ( آنتاگونیست گیرنده های موسکارینی ) تقسیم شدند. نتایج به صورت میانگین ± خطای استاندارد نشان داده شده است. سطح معنادار در حدp<0.05 انتخاب گردید. یافته ها: نتایج ما اثرات مهاری ال-آرژنین بر روی خواص پایه و وابسته به سرعت گره دهلیزی- بطنی اشکار کرد. L- NAME نتوانست اثرات ال-آرژنین را بر روی خواص پایه و وابسته به سرعت از بین ببردمعهذا در غلظت بالا(100 میکرو مولار)خود اثر مستقیم مهاری در گره داشت. نادولول و اتروپین بترتیب توانستند اثرات نیتریک اکساید را بر خواص پایه گره و بر روی پدیده خستگی جلوگیری کنند. نتیجه گیری: سیستم نیترژیک خواص الکتروفیزیولوژیک پایه و وابسته به سرعت گره دهلیزی-بطنی را از طریق گیرنده های سمپاتیک و پاراسمپاتیک متاثر میکند. http://ppj.phypha.ir/article-1-583-fa.pdf 2014-05-15 12 22 کلید واژه‌ها: نیتریک اکساید،مدل گره دهلیزی-بطنی ایزوله،آدرنرژیک،کولینرژیک Effect of nitric oxide modulation on the basic and rate-dependent electrophysiological properties of AV-node in the isolated heart of rabbit: The role of adrenergic and cholinergic receptors Introduction: Recent studies showed that nitrergic system have specific modulatory effects on electrophysiological properties of atrioventricular (AV) node. The aim of this study was to determine the effects of nitric oxide (NO) on the electrophysiological properties of isolated rabbit AV node and to investigate the role of adrenergic and cholinergic receptors in the mechanism of its action. Methods: In our laboratory, an experimental model of isolated double-perfused AV-node of rabbits weighing 1.5-2 kg was used. Specific experimental protocols of recovery, Facilitation, Fatigue and Wenckbach were applied in both control and in the presence of the drug. A total number of 35 rabbits were divided randomly into the following groups (n=7): 1) L-Arg (NO donor) (250, 750 and 1000 μmol), 2) L- NAME, a NO synthesis inhibitor (25, 50 and 100 μmol), 3) L-Arg + L- NAME, 4) Nadolol (1 μmol), 5) Atropine (3 μmol). All data were shown as mean ± SE. The level of statistical significance was set at p<0.05. Results: Our results revealed the depressant effect of L-Arg on the basic and rate-dependent electrophysiological properties of AV-node. L- NAME did not deteriorate the effects of L-Arg on the basic and rate-dependent properties, nevertheless, at high concentration (100 μmol) it had a direct inhibitory effect on the AV-node. Nadolol and atropine could prevent the effects of NO on the basic nodal characteristics and the fatigue phenomenon, respectively. Conclusion: Nitergic system can affect basic and rate-dependent electrophysiological properties of the AV-node through adrenergic and cholinergic receptors. http://ppj.phypha.ir/article-1-583-en.pdf 2014-05-15 12 22 Keywords: Nitric oxide Isolated AV-node Adrenergic cholinergic Vahid Khori 1 AUTHOR Ali Davarian alidavarian@gmail.com 2 AUTHOR Mohsen Nayebpour 3 AUTHOR Saeed Saleki 4 AUTHOR Aref Salehi 5 AUTHOR Ahmadali Shirafkan 6 AUTHOR Fakhri Badaghabadi 7 AUTHOR Mona Pourabouk 8 AUTHOR Alimohammad Alizadeh 9 AUTHOR Shima Changizi 10 AUTHOR
OTHERS_CITABLE مهار فعالیت آنزیم نیتریک اکساید سینتاز آسیب های مغزی ناشی از ایسکمی-خون رسانی مجدد ناشی از ایسکمی-موضعی را در موش صحرایی بهبود می بخشد   مقدمه: نیتریک اکساید در آسیب های مغزی ناشی از ایسکمی نقش دوگانه ای داشته ولی هنوز تاثیر آن بر میزان جریان خون ناحیه ایسکمی شده و دخالت آن در تشدید یا تخفیف ادم مغزی مشخص نشده است. لذا در این تحقیق سعی شده تا قبل، حین و بعد از ایسکمی میزان جریان خون ناحیه درگیر مغز اندازه گیری و تاثیر مهار آنزیم نیتریک اکساید سینتاز با کمک L-NAME مورد مطالعه قرار گرفته و همزمان اثر آن بر حجم ضایعه ناحیه ایسکمی شده و میزان ادم مغزی مشخص گردد.   روش ها: در این مطالعه از مدل ایسکمی موضعی-موقتی با 60 دقیقه انسداد شریان میانی مغز و 12 ساعت خون رسانی مجدد استفاده گردید. سه گروه 12 تایی موش صحرایی، گروه شاهد، گروه ایسکمی درمان نشده و پیش درمان شده با L-NAME ( mg/kg, IP 1) استفاده گردید. جریان خون ناحیه ای با کمک لیزر داپلر اندازه گیری شده و پس از ارزیابی اختلالات عصبی-حرکتی مغز حیوانات به طور جداگانه برای تعیین حجم ضایعه با روش TTC و یا اندازه گیری درصد آب بافتی و ادم مغزی مورد استفاده قرار گرفت.   یافته ها: در گروه پیش درمان شده اختلالات عصبی-حرکتی در مقایسه با گروه کنترل ایسکمی به طور معنی داری از 33/0±66/3 به 34/0±5/1 کاهش پیدا کرد. همچنین به ترتیب حجم ضایعه کورتکس از 34± 374  mm3 تا 41±160 mm3، استریاتوم از 15±158 mm3  تا mm3 16±87 ، تورم بافتی از 27/1±35/7 % تا91/0±05/4 % و ادم مغزی از 48/0±5/3 % تا 6/0±6/1 % بدون اینکه بین میزان جریان خون منطقه ایسکمی دو گروه تفاوتی وجود داشته باشند کاهش یافت.   نتیجه گیری: این مطالعه نشان می دهد که مهار آنزیم نیتریک اکساید سینتاز حجم ضایعه و ادم مغزی ایجاد شده ناشی از انسداد موقت شریان میانی مغز را بدون تاثیر در جریان خون منطقه ایسکمی کاهش داده و باعث بهبودی اختلالات عصبی-حرکتی می شود.   http://ppj.phypha.ir/article-1-588-fa.pdf 2014-05-15 23 33 ضایعه ایسکمی- خون رسانی مجدد، نیتریک اکساید سنتاز، L-NAME، جریان خون منطقه ایسکمی، اختلالات عصبی-حرکتی، ادم مغزی Inhibition of nitric oxide synthase activity improves focal cerebral damage induced by cerebral ischemia/reperfusion in normotensive rats Introduction: Nitric oxide seems to play a dual role in ischemia/reperfusion injury. Few studies have investigated whether it exacerbates or improves brain edema. In the present study, we inhibited the activity of nitric oxide synthase by L-NAME and evaluated the cerebral infarct volume, tissue swelling and brain edema, alongside the measurement of blood flow of the ischemic region. Methods: Transient focal cerebral ischemia was induced by 60 min middle cerebral artery occlusion followed by 12 hours reperfusion in rat. Experiments were performed in three groups of rats (n=12 each) Sham, control ischemic, and L-NAME pretreated (1 mg/kg IP). Laser Doppler flowmetry was used to measure the regional blood flow. After neurological deficit score (NDS) testing, the brains were prepared for TTC staining or brain water content technique to measure the infarct volume and brain edema. Results: Pretreatment with L-NAME significantly reduced NDS (3.66 ± 0.33 to 1.5 ± 0.34), infarct volume of cortex (374 ± 34 to 160 ± 41 mm3) and striatum (158 ± 15 to 87 ± 16 mm3), tissue swelling (7.35 ± 1.27% to 4.05 ± 0.91%) and brain edema (3.5 ± 0.48% to 1.6 ± 0.6%) without significant alteration of blood flow of the ischemic region. Conclusion: The findings of this study indicate that inhibition of nitric oxide synthase activity reduces infarct volume and brain edema of the ischemic region induced during 60 min middle cerebral artery occlusion. This effect is not accompanied with any alteration in the blood flow of the ischemic region. http://ppj.phypha.ir/article-1-588-en.pdf 2014-05-15 23 33 Key words: Ischemia/reperfusion injury; Nitric oxide synthase; L-NAME; Regional blood flow; Neurological deficit; Brain edema Mohammad Taghi Mohammadi 1 AUTHOR Seyed Mostafa Shid Moosavi 2 AUTHOR Gholam Abbas Dehghani dehghang@sums.ac.ir 3 AUTHOR
OTHERS_CITABLE اثر تزریق داخل بطنی مغزی فلونیکسین مگلومین (Flunixin Meglumine) بر تشنجات ناشی از PTZ در موش صحرایی نر   مقدمه: فلونیکسین مگلومین داروی ضد التهاب غیر استروئیدی و مهارکننده­ی غیرانتخابی سیکلواکسیژناز می­باشد با توجه به نقش آنزیم سیکلواکسیژناز در صرع، پژوهش حاضر به منظور ارزیابی علمی و آزمایشگاهی اثر این ترکیب بر درمان صرع ناشی از PTZ به انجام رسیده است.   روش­ها : در این تحقیق موش های صحرایی نر نژاد ویستار ( g 20 ± 200)قبل از تجویز داخل صفاقی پنتیلن تترازول( PTZ ) ( mg/kg 80)برای القاء تشنج، تحت تزریق داخل بطنی مغزی سالین یا فلونیکسین ( µ g 5/12، µ g 25 و µ g 50)(هر یک به حجم یک میکرولیتر)قرار گرفتند. سپس امتیاز تشنجی ( Seizure Score ) و زمان بروز هر یک از مراحل تشنج در مدت زمان 20 دقیقه پس از تجویز PTZ ثبت گردید. یافته­های حاصل ازاندازه­گیری مذکور با استفاده از آنالیز واریانس یک طرفه مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.   یافته­ها : نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد تزریق دو دوز 25 و 50 میکروگرم از فلونیکسین زمان لازم برای شروع هر یک از مراحل تشنج القا شده توسط PTZ را در مقایسه با گروه کنترل بطور معنی­داری افزایش داد( P< 0.05 ). ضمنا در گروه دریافت کننده دوز 50 میکروگرم فلونیکسین مرحله­ی پنجم مشاهده نگردید. در حالیکه گروه دریافت کننده دوز 5/12 میکروگرم فلونیکسین اثری بر زمان لازم برای شروع هر یک از مراحل تشنج القا شده با PTZ در مقایسه با گروه کنترل نداشت( P>.05 ). همچنین گروه­های دریافت کننده دوزهای 25 و 50 میکروگرم فلونیکسین امتیاز تشنجی ( Seizure Score ) را در مقایسه با گروه کنترل بصورت معنی­داری کاهش داد( P<.05 ).   نتیجه گیری : براساس نتایج حاصل داروی فلونیکسین دارای خاصیت ضد تشنجی به شکل وابسته به مقدار است.    http://ppj.phypha.ir/article-1-576-fa.pdf 2014-05-15 34 40 صرع، فلونیکسین مگلومین، پنتیلن تترازول ، سیکلواکسیژناز Effect of intracerebroventricular injection of flunixin meglumine on PTZ-induced seizures in male rats Introduction: Flunixin Meglumine (FM) is a nonsteroidal antiinflammatory drug (NSAID) and nonselective cyclooxygenase (COX) inhibitor. Since it has been suggested that COX enzyme plays a role in seizure, this research is performed to assess the therapeutic effects that this compound might have in seizures induced by PTZ. Methods: In this research, male wistar rats (200 ± 20 g) were given intracerebroventricular injections of saline or FM (12.5 μg, 25 μg and 50 μg) in a 1 μl volume, before intraperitoneal administration of PTZ (80 mg/kg) for induction of seizure. Then, seizure score and times of onset for every stage of seizure were recorded during 20 minutes after PTZ administration. The data were analyzed by one-way analysis of variance (ANOVA). Results: injection of 25 and 50 μg of FM significantly increased times of onset of every seizure stage compared to the control group. The group that received 50 μg of FM did not show stage 5. On the other hand, 12.5 μg FM group did not show any significant difference with the control group. Conclusion: We conclude that FM has dose dependent anticonvulsive properties. http://ppj.phypha.ir/article-1-576-en.pdf 2014-05-15 34 40 Epilepsy Flunixin Meglumine PTZ COX Soheila Garavand 1 AUTHOR Keivan Keramati 2 AUTHOR Morteza Zendehdel zendedel@ut.ac.ir 3 AUTHOR Mahin Jadidoleslami 4 AUTHOR Sedigheh Garavand 5 AUTHOR
OTHERS_CITABLE بررسی اثر میانجی کیس‌پپتین بر تحریک نورون‌های هورمون آزاد کننده گونادوتروپین توسط استروژن در ناحیه پیش‌بینایی مغز گوسفند چکیده مقدمه: نقش استروژن در تحریک نورونهای هورمون آزاد کننده گونادوتروپین روشن است. چون این نورونها گیرنده آلفای استروژن را بیان نمی کنند، بنابراین بایستی نورونهای میانجی وجود داشته باشند که اثر بازگشتی مثبت استروژن را به نورونهای هورمون آزادکننده گونادوتروپین انتقال دهند. نورونهای کیسپپتین نقش مهمی در تحریک نورونهای هورمون آزاد کننده گونادوتروپین دارند و بنابراین میتوانند میانجی اثر استروژن بر نورونهای هورمون آزاد کننده گونادوتروپین در ناحیه پیش بینایی هیپوتالاموس مغز در میش باشند. یکی از شناخته شدهترین کنشهای استروژن تحریک ژن فاس در مغز است. هدف مطالعه حاضر مشخص نمودن نقش میانجی کیس پپتین در انتقال اثرات استروژن بر نورونهای هورمون آزاد کننده گونادوتروپین در ناحیه پیشبینایی مغز گوسفند است. روش ها: شش راس میش بالغ در فصل جفتگیری انتخاب و تخمدانبرداری شدند. به 3 میش گروه تیمار 50 میلیگرم استرادیول بنزوات در 1 میلیلیتر روغن گل آفتاب - گردان و به 3 میش گروه شاهد 1 میلیلیتر محلول نمکی به صورت عضلانی تزریق شد. بعد از تزریق استرادیول و خارج کردن هیپوتالاموس مغز، در ناحیه پیش بینایی، شمار نورونهای کیسپپتین، شمار ژنهای فاس و شمار نورونهای کیسپپتین که با ژن فاس همپوشانی داشتند با روش ایمیونوهیستوشیمی تعیین شدند. نتایج نشان .(P=0/ یافته ها: تزریق استرادیول میزان همپوشانی بیان کیسپپتین و ژن فاس را در ناحیه پیشبینایی مغز میش در مقایسه با گروه شاهد افزایش داد ( 01 .(P=0/ 86 درصد نورونهای کیسپپتین با ژن فاس در ناحیه پیش بینایی همپوشانی میکنند ( 01 / می دهد که 9 نتیجه گیری: نورونهای کیسپپتین میانجی مهمی در انتقال اثرات بازگشتی مثبت استروژن به نورونهای هورمون آزاد کننده گونادوتروپین در ناحیه پیش بینایی مغز گوسفند هستند. واژه های کلیدی: کیسپپتین، ژن فاس، استروژن، هورمون آزاد کننده گونادوتروپین http://ppj.phypha.ir/article-1-597-fa.pdf 2014-05-15 41 47 کیس‌پپتین، ژن فاس، استروژن، هورمون آزاد کننده گونادوتروپین Intermediary role of kisspeptin in the stimulation of gonadotropin-releasing hormone neurons by estrogen in the preoptic area of sheep brain Introduction: The role of estrogen in the stimulation of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) neurons is clear. These neurons do not express estrogen alpha receptors, so other mediator neurons should be present to transmit the positive feedback effect of estrogen to the GnRH neurons. Kisspeptin neurons have an important role in the stimulation of GnRH neurons, so they can be the mediator of the effect of estrogen on GnRH neurons in preoptic area of sheep brain. One of the known effects of estrogen is the stimulation of Fos gene in the brain. The aim of the present study was to determine the intermediary role of kisspeptin in the transmission of estrogen effects to the gonadotropin-releasing hormone neurons in the preoptic area of sheep brain. Methods: Six mature ewes in breeding season were selected and ovariectomised. Three ewes in treatment group were injected with 50 mg estradiol benzoate in 1 ml of sunflower oil and three ewes in control group were injected with saline solution intramuscularly. Immediately after estradiol injections, the hypothalamus of the ewes was removed. The count of kisspeptin neurons, Fos genes, and kisspeptin neurons which colocalized with Fos genes were determined by immunohistochemistry. Results: Estradiol injection increased the colocalization of kisspeptin with Fos gene in the preoptic area of the sheep brain (P=0.01). Results of the present study showed that 86.9 percent of kisspeptin neurons colocalized with Fos gene in the preoptic area (P=0.01). Conclusion: Kisspeptin neurons are important mediators in transmission of positive feedback effect of estrogen into GnRH neurons in the preoptic area of sheep brain. http://ppj.phypha.ir/article-1-597-en.pdf 2014-05-15 41 47 Key words: Kisspeptin; Fos gene; Estrogen; Gonadotropin-releasing hormone. Mohammad Reza Jafarzadeh Shirazi mrjaafarzadeh@yahoo.com 1 AUTHOR Amin Tamadon tamadon@shirazu.ac.ir 2 AUTHOR
OTHERS_CITABLE Effects of congenital hypothyroidism on the morphology of trigeminal motoneuron assessed by the Golgi staining method in rats Introduction: Appropriate thyroid hormone (TH) levels are essential during the critical period of brain development, which is associated with the growth of axons and dendrites and synapse formation. In rats, oral motor circuits begin to reach to their adult pattern around 3 weeks after birth, the period in which alteration from sucking to biting and chewing occurs (weaning time). Trigeminal motor nucleus (Mo5) as the supplier of nerves that innervate jaw muscles, shows obvious developmental changes during this period. TH may have an important role in these changes. Methods: Time pregnant female rats received 50 ppm propylthiouracil (PTU) in their drinking water from 16th day of pregnancy, continued to 23rd day post partum, while control group received tap water. Brain stems of 6 male 23-dayold pups in each experimental group were processed for Golgi staining method. Using rotary microtome, brain stem paraffin embedded blocks were cut to 70 micron slices. Mo5 tissue sections were selected for photography and morphological analysis. Cell body measurements were performed using Starter image analyzer software. Modified Sholl’s concentric circles technique was used for the morphological analysis of the dendrites. Results: The results of cell body measurements revealed a significant decrease in the soma size of trigeminal motoneurons in hypothyroid pups. Besides, counting of the dendrites showed that the number of secondary, tertiary and higher order dendrites, but not primary dendrites, showed a significant decrease compared to the normal group. Conclusion: The important role of thyroid hormone in motoneurons development and neurofilaments formation suggests that congenital hypothyroidism can alter the cell size and dendritic arborization pattern of trigeminal motoneurons. http://ppj.phypha.ir/article-1-615-en.pdf 2014-05-15 48 55 Key words: hypothyroidism trigeminal motoneurons dendrite arborization Hamid Sepehry hamsep49@yahoo.com 1 1. Department of Physiology, Faculty of Medicine, Golestan University of Medical Sciences and2. Golestan Neurosciense Research Center AUTHOR Farzaneh Ganji fganji2@yahoo.com 2 Department of Biology, Faculty of Sciences, Golestan University and 2. Golestan Neurosciense Research Center AUTHOR
OTHERS_CITABLE طراحی، کلون، بیان و ارزیابی جایگزین های سیستئینی مولکول استرپتوکیناز در اندازه های کامل و کوتاه شده   مقدمه: ترومبوز یا انسداد عروق خونی توسط لخته، می تواند منجر به سکته قلبی و گاهی اوقات مرگ شود. صرفنظر از رفع انسداد به کمک جراحی، تنها درمان موجود تجویز عوامل ترومبولیتیک بمنظور از بین بردن لخته است. استرپتوکیناز رایجترین داروی فیبرینولیتیک برای این منظور است، اما با این وجود تجویز آن با مشکلاتی از جمله تحریک سیستم ایمنی، نیمه عمر کوتاه دارو و خونریزی همراه می باشد. پگیلاسیون پروتئینهای داروئی با واسطه اسید آمینه سیستئین یک روش نوین کاستن از ایمنی زائی دارو و همچنین افزایش پایداری و نیمه عمر آنها است. هدف نهائی این مطالعه طراحی و ساخت جایگزینهای سیستئینی استرپتوکیناز کامل و نیز اشکال کوتاه شده آن، که با داشتن اختصاصیت به فیبرین اثرات هموراژیک کمتری دارند، می باشد. مواد و روشها: با استفاده از تکنیک موتاسیون زائی در ناحیه دلخواه به کمک PCR موتانتهای ژنهای استرپتوکیناز، دارای جایگزینی کدون AGC (سرین) با TGC (سیستئین)، که پروتئینهای با طول کامل (اسیدهای آمینه 414-1) و کوتاه شده (اسیدهای آمینه 386-60 و 386-143) را کد می کردند ساخته شده و در پلاسمید pET41a کلون شدند. بدنبال القاء باکتری های ترانسفورم شده E. coli استرپتوکیناز های نوترکیب بیان شدند و پروتئینهای حاصل با انجام وسترن بلات تائید شده، به روش کروماتوگرافی میل ترکیبی تخلیص شده و در نهایت از نظر فعالیت بیولوژیک مورد ارزیابی قرار گرفتند. یافته ها: بیان ژنهای استرپتوکیناز موتانت بخوبی صورت گرفته و پروتئین های نوترکیب با اندازه های کامل و کوتاه شده بواسطه اتصال به برچسب هیستیدینی ناشی از ناقل ژنی به راحتی تخلیص شدند. همچنین علیرغم جایگزینی سرین با سیستئین در جایگاه اسیدآمینه ای 208، پروتئینهای نوترکیب جدید همچنان فعالیت بیولوژیک خود را حفظ کردند. نتیجه گیری: پروتئینهای موتانت تولید شده در این مطالعه امکان انجام فرآیند پگیلاسیون اختصاصی بر روی سیستئین و به این ترتیب ارتقاء فعالیت بالینی پروتئین استرپتوکیناز را فراهم می آورند. http://ppj.phypha.ir/article-1-572-fa.pdf 2014-05-15 56 65 استرپتوکیناز، پگیلاسیون، موتاسیون زائی، جایگزین سیستئینی Design, cloning, expression and evaluation of cysteine-substitutes of intact and truncated molecules of streptokinase Introduction: Thrombosis and the blockage of blood vessels with clots, can lead to acute myocardial infarction and some times even death. Aside from surgical interventions to remove the blockage, the only available treatment is the administration of thrombolytic agents to dissolve the blood clot. Streptokinase (SK) is the most commonly used fibrinolytic drug for this purpose. However, SK has some disadvantages including immunogenicity, short half-life and hemorrhage induction. PEGylation of pharmaceutical proteins by the incorporation of cysteine amino acid is a novel method to decrease their immunogenicity and also to increase their stability and half-life. The ultimate goal of this study was designing and construction of the cysteine analogues of full-length and truncated forms of SK, which posses less hemorrhagic side effects due to fibrin specificity. Methods: By application of PCR-based site-directed mutagenesis technique, mutants of SK genes, harboring the transversion of AGC codon (serine) to TGC (cysteine), which encoded full-length (amino acids 1-414) and truncated (amino acids 60-386 and 143-386) proteins were established and cloned in pET41a plasmid. Expression of the recombinant SKs was achieved through the induction of E. coli transformants. Produced proteins were confirmed by western blotting, purified by affinity chromotography and finally evaluated for their biological activity. Results: Mutant SK genes were efficiently expressed and due to the fusion of vector-derived His-tag the recombinant full-length and truncated proteins were easily purified. Also despite the replacement of serine to cysteine in the position of 208, the biological activity of the new recombinant protein was still maintained. Conclusion: The produced mutants of this study provide the possibility of establishing the cysteine specific PEGylation process and improvement of clinical activity of streptokinase protein. http://ppj.phypha.ir/article-1-572-en.pdf 2014-05-15 56 65 Key words: Streptokinase PEGylation Mutagenesis Cysteine analogue Nastaran Monzavi nst_monzavi 1 AUTHOR Mohamad Reza Aghasadeghi mr_sadeqi@yahoo.com 2 AUTHOR Reza Arabi arab552@yahoo.com 3 AUTHOR Arash Memarnejadian amemarnejad@ 4 AUTHOR Mehdi Sadat mehdi_sadat@yahoo.com 5 AUTHOR Hossein Khanahmad Hossein_khnahmad@yahoo.com 6 AUTHOR Melania Ebrahimi melania_ab@yahoo.com 7 AUTHOR Farzin Roohvand Farzin.Roohvand@gmail.com 8 AUTHOR
OTHERS_CITABLE نقش گیرنده های آلفا ـ آدرنرژیک ناحیه CA1 هیپوکامپ بر اختلال حافظه القاء شده با اسکوپولامین در موش صحرایی نر مقدمه : مطالعات نشان می دهند که شباهت های زیادی بین نقص حافظه ایجاد شده در بیماران مبتلا به آلزایمر و حیوانات تیمار شده با اسکوپولامین وجود دارد . مطالعه حاضر به منظور بررسی نقش گیرنده های آلفا ـ آدرنرژیک هیپوکامپ پشتی در یادگیری وابسته به وضعیت القاء شده با اسکوپولامین در موشهای بزرگ آزمایشگاهی نر انجام گرفته است . روش : کانول گذاری به صورت دو طرفه در ناحیه هیپوکامپ پشتی رت های نر صورت گرفت ، موش ها در دستگاه یادگیری اجتنابی مدل step-through آموزش دیدند و تست حافظه 24 ساعت بعد از آموزش به صورت اندازه گیری زمان تاخیر ورود به خانه سیاه ( محل تحریک ) انجام شد . یافته ها : نتایج این تحقیق نشان می دهد که تزریق پس از آموزش اسکوپولامین (µg/rat 2 ، 5/0) به هیپوکامپ پشتی به صورت وابسته به دوز زمان تاخیر ورود به خانه سیاه را کاهش می دهد که نشان دهنده ایجاد فراموشی است. فراموشی ایجادشده توسط تزریق پس از آموزش اسکوپولامین( µg/rat2 ) با تزریق قبل از تست اسکوپولامین (µg/rat 2 ، 5/0) اصلاح شد که نشان دهنده ایجاد فرایند یادگیری وابسته به وضعیت است. تزریق قبل از تست فنیل افرین(µg/rat 5/0 ، 25/0) آگونیست 1α آدرنرژیک نتوانست جلوی تخریب حافظه ایجاد شده توسط تزریق پس از آموزش اسکوپولامین ( µg/rat2 ) را بگیرد. با این حال تزریق کلونیدین ( µg/rat5/0) آگونیست 2α آدرنرژیک در روز آزمون توانست حافظه تخریب شده با اسکوپولامین( µg/rat2 ) روز آموزش را اصلاح نماید . بعلاوه تزریق فنیل افرین(µg/rat 5/0 ، 25/0) یا کلونیدین (µg/rat 5/0 ، 25/0) همراه با مقادیر غیر موثر اسکوپولامین (µg/rat 25/0) در روز آزمون باعث تقویت اثر اسکوپولامین روز آزمون می شود و می تواند حافظه تخریب شده با اسکوپولامین (µg/rat 2) روز آموزش را اصلاح نماید . نتایج ما همچنین نشان می دهد تزریق درون مغزی پرازوسین(µg/rat 2 ، 1) آنتاگونیست1α آدرنرژیک یا یوهیمبین (µg/rat 2 ، 1) آنتاگونیست2α آدرنرژیک به هیپوکامپ در روز آزمون قبل از مقدار موثر اسکوپولامین ( µg/rat2 ) ، جلوی بهبود حافظه توسط اسکوپولامین روز آزمون را می گیرد . نتیجه گیری : این مشاهدات نشان می دهند که احتمالا" گیرنده های آلفا ـ 1و2- آدرنرژیک هیپوکامپ پشتی در یادگیری وابسته به وضعیت القاء شده توسط اسکوپولامین دخیل می باشد . http://ppj.phypha.ir/article-1-586-fa.pdf 2014-05-15 66 77 اسکوپولامین ، گیرنده های آلفا ـ آدرنرژیک ، هیپوکامپ پشتی ، حافظه اجتناب مهاری ، یادگیری وابسته به وضعیت The role of CA1 α-adrenoceptor on scopolamine induced memory impairment in male rats Introduction: Similarities in the memory impairment between Alzheimer patients and scopolamine treated animals have been reported. In the present study, the possible role of α-adrenergic receptors of the dorsal hippocampus on scopolamine state-dependent memory in adult male Wistar rats was evaluated. Methods: The animals were bilaterally implanted with chronic cannulae in the CA1 regions of the dorsal hippocampus, trained in a step-through type inhibitory avoidance task, and tested 24 h after training to measure stepthrough latency. Results: Post-training intra-CA1 administration of scopolamine (0.5 and 2μg/rat) dose-dependently reduced the step-through latency, showing an amnestic response. Amnesia produced by post-training scopolamine (2 μg/rat) was reversed by pre-test administration of the scopolamine (0.5 and 2 μg/rat) that is due to a state-dependent effect. Pre-test intra-CA1 injection of α1-adrenoceptor agonist, phenylephrine (0.25, 0.5 μg/rat) in the dose range that we used, could not affect memory impairment induced by post-training injection of scopolamine (2 μg/rat). However intra-CA1 pretest injection of α2-adrenoceptor agonist, clonidine (0.5 μg/rat) improved post-training scopolamine (2 μg/rat) intra- CA1 injection induced retrieval impairment. Furthermore, pre-test intra-CA1 microinjection of phenylephrine (0.25 and 0.5 μg/rat) or clonidine (0.25 and 0.5 μg/rat) with an ineffective dose of scopolamine (0.25 μg/rat), synergistically improved memory performance impaired by post-training scopolamine (2 μg/rat). Our results also showed that, pre-test injection of α1-receptor antagonist prazosin (1, 2 μg/rat) or α2-receptors antagonist yohimbine (1, 2 μg/rat) before effective dose of scopolamine (2 μg/rat) prevented the improvement of memory by pre-test scopolamine. Conclusion: These results suggest that α1- and α2-adrenergic receptors of the dorsal hippocampal CA1 region may play an important role in scopolamine-induced amnesia and scopolamine state-dependent memory. http://ppj.phypha.ir/article-1-586-en.pdf 2014-05-15 66 77 Key words: Scopolamine α-adrenergic receptors Dorsal hippocampus Inhibitory avoidance response Statedependent learning Nasrin-Sadat Azami azaminasrin@gmail.com 1 AUTHOR morteza piri biopiri@yahoo.com 2 AUTHOR Mehrdad Jahanshahi 3 AUTHOR Shahrbanoo oryan 4 AUTHOR Vahab Babapour 5 AUTHOR Mohamad Reza zarrindast 6 AUTHOR
OTHERS_CITABLE بررسی اثر ضددردی و ضد التهابی عصاره آبی گیاه مریم نخودی بر موش صحرایی نر این مطالعه به منظور تحقیق بر روی اثرات ضد دردی و ضد التهابی عصاره آبی گیاه مریم نخودی در موشهای صحرایی نر انجام شده است. به این منظور از آزمونهای تورم پنجه پا القا شده به وسیله‌ی کاراگینان و دکستران و آزمونهای درد ناشی از استیک اسید، آزمون فرمالین و روش جهش دم استفاده گردید. عصاره 200-50 میلیگرم بر کیلوگرم و 100 میلیگرم بر کیلوگرم سالیسیلیک اسید اثر مهاری معناداری بر پاسخ فاز دو آزمون فرمالین دارد (p<0.01) در حالی که فقط دوز بالای عصاره (200میلی گرم بر کیلوگرم) اثر ضد دردی در فاز یک نشان می‌دهد. عصاره همچنین مانع درد پیچش شکمی متناسب با دوز می شود. هرچند که افزایش در زمان جهش دم با عصاره دیده می شود ولی این مورد به صورت معناداری از اثر القا شده توسط مورفین (10 میلیگرم بر کیلوگرم) کمتر است (p<0.05). عصاره 250-25 میلیگرم بر کیلوگرم تجویز شده یک ساعت قبل از آزمون کاراگینان اثر مهاری متناسب با دوز درتورم نشان می دهد. تاثیری در مدل تورمی حاصل از دکستران مشاهده نشد. اطلاعات حاصل از اثرات ضد دردی و ضد التهابی عصاره می تواند ناشی از مکانیزم‌های محیطی و مرکزی باشد. وجود آلکالوئیدها، فلاونوئیدها و تری‌ترپنوئیدها می‌توانند مسئول اثرات این گیاه باشند. http://ppj.phypha.ir/article-1-595-fa.pdf 2014-05-15 78 84 مریم نخودی،ضد دردی،ضد التهاب،آزمون فرمالین،آزمون جهش دم Antinociceptive and antiinflammatory effects of Teucrium hyrcanicum aqueous extract in male mice and rats Abstract Introduction: The aim of this study was to investigate the antinociceptive and antiinflammatory effects of Teucrium hyrcanicum aqueous extract in male mice and rats. Methods: To assess the antiinflammatory effect, we used carrageenan- and dextran-induced paw oedema and for determination of the antinociceptive effect, acetic acid-induced writhing, tail flick and formalin pain tests were used. Results: The extract of T. hyrcanicum (50–200 mg/kg) and acetylsalicylic acid (100 mg/kg) produced a significant inhibition of the second phase response in the formalin pain model (P<0.01), while only the high dose of the extract (200 mg/kg) showed an analgesic effect in the first phase. The extract also inhibited acetic acid-induced abdominal writhes in a dose-dependent manner. The tail flick latency was dose dependently enhanced by the extract but this was significantly lower than that produced by morphine 10 mg/kg (P<0.05). The extract (25–250 mg/kg) administered 1 h before carrageenan-induced paw swelling produced a dose dependent inhibition of the oedema. No effect was observed with the dextran-induced oedema model. Conclusion: The obtained data suggest antiinflammatory and analgesic effects for the aqueous extract of Teucrium hyrcanicum, which may be mediated via both peripheral and central mechanisms. The presence of alkaloids, flavonoids and triterpenoids might be responsible for the antiinflammatory activity of this plant. http://ppj.phypha.ir/article-1-595-en.pdf 2014-05-15 78 84 Key words: Teucrium hyrcanicum Antinociceptive Anti-inflammatory Writhing test Formalin test Tail flick. Amir Farshchi farshchi_a@razi.tums.ac.ir 1 AUTHOR Golbarg Ghiasi ghiasi_g@razi.tums.ac.ir 2 AUTHOR Akbar Abdollahuasl abdollahiasl@gmail.com 3 AUTHOR
OTHERS_CITABLE اثر عصاره متانولی دانه های هویج ((Daucus carota بر متابولیسم کربوهیدرات و مورفولوژی پانکراس در موشهای صحرایی نر دیابتی نوع I مقدمه: اثربخشی گیاهان دارای خواص آنتی اکسیدانی در بهبود بیماری دیابت شناخته شده است و از آنجا که دانه های هویج نیز دارای خواص آنتی اکسیدانی می باشند لذا در این مطالعه اثر عصاره متانولی دانه های هویج ((Daucus carota بر متابولیسم کربوهیدرات و مورفولوژی پانکراس در موشهای دیابتی نوع I بررسی شد. روش ها: با تزریق استرپتوزوتوسین STZ)) به میزان mg/kg, i.p 70 در موشهای صحرایی نر، دیابت نوع I القاء شد. قبل از تزریق STZ و 5 روز بعد از تزریق، در حالت ناشتا، خونگیری به منظور تعیین سطح سرمی گلوکز و انسولین انجام گرفت و موشهایی که سطح سرمی گلوکز آنها بیش از mg/dl 250 بود، دیابتیک محسوب و به 5 گروه تقسیم شدند که عصاره الکلی D. carotaبا دوزهای mg/kg/day 300، 200، 100، گلایبن کلامید با دوز g/kgµ 600 و 0.5 سی سی آب مقطر(حلال عصاره) به مدت 6 روز به طور جداگانه با گاواژ دریافت کردند. بعد از 6 روز مجددا خونگیری انجام شد، سطح سرمی گلوکز به روش اسپکتروفتومتری و انسولین به روش ELISA با کیت های مربوطه اندازه گیری شد. ضمناً پانکراس حیوان خارج و در فرمالین 10% قرار گرفت و برای مطالعات بافت شناسی مورد استفاده قرار گرفت. یافته ها: تجویز عصاره دانه هویج در همه دوزها و گلایبن کلامید به مدت 6 روز سبب کاهش سطح سرمی گلوکز شد ولی تنها دوز mg/kg300 عصاره و گلایبن کلامید به طور معنی داری سطح سرمی انسولین را افزایش داد ضمناً، عصاره و گلایبن کلامید سبب بهبود جزایر و بخش آسینار پانکراس شدند بطوریکه. میانگین تعداد جزایر در موشهای دریافت کننده دوز mg/kg 100 عصاره و گلایبن کلامید بطور معنی دار افزایش یافت. نتیجه گیری : عصاره متانولی دانه های هویج (D. carota) دارای اثر هیپوگلیسمیک می باشد و احتمالا بخشی از این اثر از طریق افزایش ترشح انسولین و بهبود بافت پانکراس بویژه جزایر آن انجام می شود. http://ppj.phypha.ir/article-1-577-fa.pdf 2014-05-15 85 93 دانه های هویج، پانکراس، دیابت Effect of the methanolic extract of Daucus carota seeds on the carbohydrate metabolism and morphology of pancreas in type I diabetic male rats Introduction: Antioxidant agents have beneficial effects in diabetes mellitus. Daucus carota seeds extract has been shown to possess antioxidant activity. In this study, the effect of the methanolic extract of Daucus carota seeds on carbohydrate metabolism and morphology of pancreas was investigated in type I diabetic male rats. Methods: Type I diabetes mellitus was induced in male Wistar rats by injection of 70 mg/kg, i. p. of streptozotocin. Blood samples were collected from the eye cavernousa sinus, before and 5 days after injections for measurement of glucose and insulin. Diabetes was confirmed in rats that had FBS levels above 250 mg/dl. Diabetic rats were divided to 5 groups that received 100, 200 and 300 mg/kg of the extract, glibenclamide (600 μg/kg) and distilled water (0.5 ml) daily for 6 days by gastric gavage. After 6 days, they were sacrificed by decapitation and fasting blood samples were collected and serum levels of glucose and insulin were measured by spectrophotometric and ELISA methods, respectively, by using commercial kits. The pancreas of the rats were dissected out and fixed in 10% formaldehyde for histological studies. Results: Administration of all doses of Daucus carota seeds extract and glibenclamide for 6 days significantly decreased serum glucose levels, however, only 300 mg/kg of the extract as well as glibenclamide significantly increased insulin serum levels. Furthermore the extract and glybenclamide improved pancreas asinuses and islets as the number of islets significantly increased in rats receiving 100 mg/kg of the extract or glibenclamide. Conclusion: D. carota seeds extract has hypoglycemic effect by increasing insulin secretion and improvement of the pancreas. http://ppj.phypha.ir/article-1-577-en.pdf 2014-05-15 85 93 Key words: Daucus carota seeds Pancrease Diabetes Banafsheh Ranjbar 1 AUTHOR Iran Pouraboli Pouraboli_i@mail.uk.ac.ir 2 AUTHOR Mitra Mehrabani 3 AUTHOR Shahriar Dabiri 4 AUTHOR abdolreza javadi 5 AUTHOR